RESUMO
Se validó un inmunoensayo tipo sandwich de doble anticuerpo para cuantificar las impurezas proteicas de la cepa hospedera que pueden estar presentes en el principio activo de la vacuna cubana contra la hepatitis B. Seprepararon los reactivos biológicos empleados en el ELISA. Las proteínas de la cepa hospedera se obtuvieron bajo las mismas condiciones que el proceso de producción de la proteína recombinante hasta un paso de semipurificación o purificación primaria. Los antisueros dirigidos contra las proteínas de la cepa hospedera segeneraron en conejos por un proceso de inmunización en cascada. Para la validación se analizaron los siguientesparámetros: linealidad, límite de detección y cuantificación, exactitud, rango y precisión. El ensayo establecido resultó específico, con una exactitud entre 89 por ciento y 109 por ciento para todos los tampones estudiados; se demostró un ajuste parabólico y un rango de trabajo entre 0,63 y 1,25 ng/mL, la repetibilidad y la precisión intermedia mostraron coeficientes de variación inferiores al 10 y 20 por ciento respectivamente(AU)
be present in the active pharmaceutical ingredient of Cuban vaccine against hepatitis B. All biological reagentsused in the ELISA were prepared and characterized. The proteins from the host strain were obtained under thesame conditions as the production process of the recombinant protein until a purification or primary emipurificationstep. The antisera addressed against those proteins were generated in rabbits by an immunization process incascade. For validation the parameters analyzed were: linearity, limit of detection and quantification, accuracy,range and precision. The established assay was specific, and the calculated accuracy was from 89 por ciento to 109por ciento for all studied buffers. A parabolic fit and a working range from 0.63 to 1,25 ng/mL were emonstrated. The repeatability and intermediate precision showed variation coefficients below 10 por ciento and 20 por ciento respectively(AU)
